??????? 引入 HPLC 色譜柱的樣品通常多種多樣且復(fù)雜，這些樣品可能含有許多與 HPLC 條件不兼容的成分。在沒有適當(dāng)?shù)臉悠分苽浠驑悠奉A(yù)處理的情況下注入此類樣品可能會(huì)導(dǎo)致色譜柱堵塞。比如殘留的蛋白質(zhì)和高疏水性化合物（如脂質(zhì)）在反相分離過程中也可能不會(huì)完全洗脫出來，它們往往會(huì)慢慢吸附到色譜柱上并引起問題。
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??????? 不兼容的樣品稀釋劑和流動(dòng)相也會(huì)導(dǎo)致堵塞問題。如果兩者不兼容，當(dāng)將樣品引入流動(dòng)相時(shí)，如果稀釋劑與流動(dòng)相兩者對比極性太強(qiáng)，通常會(huì)出現(xiàn)樣品沉淀。
??????? 流動(dòng)相緩沖液通常用作 HPLC 中的流動(dòng)相，重要的是在使用前過濾這些緩沖鹽。有時(shí)，由于實(shí)驗(yàn)室溫度的不同，一些緩沖液成分容易沉淀，又或者使用過高濃度的緩沖液也會(huì)導(dǎo)致沉淀。
?????? 來自磨損的泵密封件或其他密封件的碎片，長期使用總會(huì)發(fā)生磨損，這些組件往往會(huì)在溶劑管路中產(chǎn)生一些碎屑或者金屬離子等。如果不對泵和進(jìn)樣口進(jìn)行定期維護(hù)，雜質(zhì)往往會(huì)到達(dá)色譜柱篩板并堵塞色譜柱。
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?????? 現(xiàn)在我們知道了色譜柱被阻塞的問題，我們?nèi)绾伪Ｗo(hù)它？為了保護(hù) HPLC 色譜柱（分析型和制備型）免受污染，例如進(jìn)樣中的微粒、未過濾的流動(dòng)相組分或進(jìn)樣器磨損的泵密封/轉(zhuǎn)子密封的碎片，建議使用色譜保護(hù)柱。
??????? 保護(hù)柱本質(zhì)上是一個(gè)微型色譜柱，理想情況下填充與分析柱相同的填料，并連接在分析柱之前。恒譜生有各種尺寸以匹配不同型號的色譜柱的要求。保護(hù)柱中的篩板與分析柱中的篩板類似，這意味著任何可能阻塞分析柱的東西都會(huì)被保護(hù)柱阻塞。然后可以通過簡單地更換保護(hù)柱或者保護(hù)柱篩，從而延長分析柱的使用壽命。
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??????? 如何挑選合適的恒譜生保護(hù)柱？保護(hù)柱的填充材料（固定相）應(yīng)與分析柱的填充材料相同，以使選擇性不會(huì)發(fā)生變化。保護(hù)柱的 ID 應(yīng)與分析柱的 ID 相同或小于分析柱的 ID，以盡量減少增加的譜帶展寬。始終使用 ID 最接近色譜柱 ID 的防護(hù)裝置。保護(hù)柱的長度應(yīng)盡可能短以避免額外的死體積，可以選擇恒譜生直連保護(hù)柱，直接連接UHPLC和UPLC色譜柱，省去中間的連接管路和接頭螺絲，消除溶劑泄露問題與連接死體積，日常操作使用更方便簡潔、更易于操作。
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發(fā)布于: 2022-02-11